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河南省腫瘤醫院，生物醫學研究室研究員，趙承彥
作為一位科研工作者，接觸到中國生物器材網也有好幾年的時間了。平時遇到需要采購一些儀器也會習慣在生物器材網搜索查詢。近日恰巧登陸網站看到20周年的征文活動，就從我平時工作接觸到的細胞計數為例，說一些我的看法和建議。 目前生物醫學領域應用的細胞計數儀器都存在一些問題，細胞計數準確度都不高。細胞計數的目的是確定細胞懸液里的細胞密度，要求真實、準確。細胞密度是單位體積內的細胞數。細胞密度由計數樣本體積和樣本體積里細胞數兩個測量參數構成。兩個測量參數有一個計量不準確，細胞密度就不準確。根據這兩個測量參數，看看目前常用的幾種細胞計數儀器存在的問題。 包括最常用的血球計數板，流式細胞計數儀，細胞自動計數分析儀，這三種類型的細胞計數方法，涵蓋了現代生物醫學領域細胞計數的基本技術和方法。三種類型細胞計數方法存在的主要問題是檢測獲得的細胞密度都不夠準確，其次還存在兩個問題：一是檢驗細胞樣品不能回收再用，二是不能準確計數總量小于1000個細胞的樣本。例如，極限稀釋細胞克隆實驗是研究細胞增殖、分化、凋亡的一種方法，需要準確計數幾百個細胞，然后回收單個種植到培養孔內。上述三種細胞計數方法都做不到。 計數細胞獲得一個準確的細胞密度，看起來很復雜，難度很大，實際上真正理解了細胞計數的目的和要求也不難解決。如果能夠準確取一定量細胞樣本，放到一個容器里，準確記錄全部細胞，問題就解決了。怎樣準確記錄一個容器里的全部細胞？如果容器里有幾百個細胞，無規律分布在底面上，用顯微鏡觀察，全部準確計數出來不太可能，如果把容器底部分割成許多個方格，標出行列號，一個方格中只有幾個細胞（不超過10個），很容易準確記錄出來，既不會漏計，也不會重計，將各個方格里的細胞數匯總起來就是全部細胞數。實際上將細胞培養板底部標記上方格，用之替代血球計數板和Cellometer的細胞樣品室，問題就解決了。 類似這樣在科研工作中遇到的問題，很希望有一個平臺能架起我們用戶和企業溝通的橋梁，通過共同的努力來解決問題。期望中國生物器材網今后能夠再進一步深層次的為科研用戶解決困難。 |